兰州大学学报(医学版)

2012, v.38;No.141(03) 17-22+26

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RNA干扰沉默编码跨膜蛋白35基因表达对肝癌细胞生长及细胞周期的影响
Effect of coding transmembrane protein 35 gene on cell proliferation and cell cycle in hepa-toma cells by RNA interference

李坤雨;李牛;王群;张壮壮;韩泽广;邓庆;

摘要(Abstract):

目的研究跨膜蛋白35(T MEM35)基因在肝癌细胞生长、细胞周期中的作用,探讨跨膜蛋白TMEM35作为潜在肝癌治疗靶点的可行性。方法利用跨膜蛋白二级结构预测工具SPLIT对TMEM35蛋白的二级结构进行分析;利用实时定量多聚酶链反应技术检测TMEM35基因在肝癌患者癌组织及相应癌旁组织中的表达情况;采用化学合成干扰小RNA片段(siRNA)干扰TMEM35基因在肝癌细胞MHCC-97H、MHCC-97L中的表达,通过软琼脂克隆形成实验观察肝癌细胞非贴壁依赖性克隆生长情况,流式细胞术分析细胞周期;通过蛋白功能相互作用网络数据库STRING推测TMEM35蛋白发挥相应功能的搭档基因。结果 TMEM35为具有4个跨膜结构域的四跨膜蛋白,实时定量多聚酶链反应检测发现TMEM35基因在肝癌中表达紊乱,其中与相应癌旁组织相比较,TMEM35在14例癌组织中表达显著上调,在20例癌组织中表达显著下调(P<0.05)。针对TMEM35基因设计合成siR NAs能够特异性沉默TMEM35基因在肝癌细胞株MHCC-97H、MHCC-97L中的表达,并且肝癌细胞在软琼脂培养条件下,形成的克隆显著减少。流式细胞术分析发现干扰TMEM35基因表达,能够减缓细胞周期进展,表现为细胞G_1期增多,S期减少。结论 TMEM35基因编码具有四跨膜结构域的膜蛋白,在肝癌细胞生长中发挥重要作用。

关键词(KeyWords): RNA干扰;四跨膜蛋白;肝癌;细胞周期

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 上海市科委自然科学基金(11ZR1425300);; 国家自然科学基金(81101875)

作者(Author): 李坤雨;李牛;王群;张壮壮;韩泽广;邓庆;

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DOI: 10.13885/j.issn.1000-2812.2012.03.014

参考文献(References):

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