- 赵亮涛;金侨英;朱嘉睿;王晋;杨明轩;徐丁;王凡;朱宏文;
目的对两例疑似肝豆状核变性的家系进行遗传分析,对候选致病基因ATP7B进行突变鉴定,从分子遗传学水平上进行基因诊断和遗传咨询。方法采用酚氯仿法提取外周血基因组DNA,通过聚合酶链式反应及Sanger测序等方法,分别检测两例肝豆状核变性患病家庭中所有成员的ATP7B基因外显子及侧翼序列的突变情况。结果分别在2个家系先证者的ATP7B基因上发现1个纯和突变和1个杂合突变,共检测出3种致病性的突变位点(p.Val1216Met、p.Ser693Cys、p.Ala874Val)和1个单核苷酸多态c.2495 A>G,同时结合单倍体分析法明确家系成员的发病规律符合常染色体隐性遗传的典型特点。结论应用基因测序技术直接检测肝豆状核变性致病基因ATP7B全外显子及侧翼序列,是目前针对肝豆状核变性这一疾病最为快速、准确的确诊方法。
2018年03期 v.44;No.171 1-7页 [查看摘要][在线阅读][下载 2656K] [下载次数：92 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：19 ] - 魏小乐;王晓霞;贾怀杰;景志忠;王永祥;谭继英;
目的真核细胞内,DNA甲基化调控在转座子沉默、基因表达调控、甚至病毒感染过程中起关键作用,其中HIV-1启动子的甲基化修饰在病毒潜伏感染中扮演重要角色。为明确载脂蛋白B mRNA编辑酶催化亚基3A(APOBEC3A,A3A)对HIV-1启动子5'LTR上CpG岛甲基化程度的调节作用,本研究构建并筛选出A3A异构体A3A Isotype a(A3Aa)和A3A Isotype b(A3A-b)高表达真核载体,分析其去甲基化功能。方法从THP-1细胞mRNA中扩增得到A3A-a和A3A-b的c DNA,分别克隆至真核表达载体pASIB-HA和pCAGGS-HA。转染HEK-293T细胞,蛋白印迹法检测A3A-a和A3A-b的蛋白表达,并筛选出A3A-a和A3A-b的高表达载体。接着将A3A-a和A3A-b高表达载体与实验室构建并修饰的HIV-1启动子甲基化载体p-me LTR-EGFP共转染HEK-293T,检测指示蛋白EGFP在细胞水平中的表达,评价A3A-a和A3A-b的去甲基化调节作用。结果 PCR结果、酶切鉴定和测序结果均表明A3A真核表达载体pASIB-HA-A3A1-a、pCAGGS-HA-A3A2-a、pASIB-HA-A3A1-b、pCAGGS-HA-A3A2-b构建成功。经过筛选,pCAGGS-HA-A3A2-a和pCAGGS-HA-A3A2-b中A3A蛋白表达量最高,并用于后续实验。甲基化载体共转染实验显示,相较于对照A3G转染组,A3A-a和A3A-b组中EGFP的表达量明显上调。结论本研究在细胞水平上证实A3A分子Isotype a和Isotype b均可识别DNA中5-甲基化胞嘧啶,催化HIV-1启动子CpG岛去甲基化,为后续研究A3A对HIV潜伏感染调控奠定了基础。
2018年03期 v.44;No.171 8-15页 [查看摘要][在线阅读][下载 1887K] [下载次数：90 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：24 ] - 张春燕;李瑞;张渝君;肖智雄;牛孟孟;
目的探讨E47蛋白在KRas~(G12V)介导肿瘤细胞迁移中的作用。方法在人非小细胞肺癌H1299细胞中,利用慢病毒感染技术过表达Vector、E47、KRas~(G12V)以及过表达KRas~(G12V)并且同时敲低E47的四株稳定细胞系;然后收集细胞,通过Western blot检测E47和Ras等相关蛋白的表达,同时利用Transwell小室的方法检测细胞的迁移能力。结果原癌基因Ras的热点突变KRas~(G12V)能够显著上调E47蛋白的表达且不调控其m RNA水平,同时上调Twist1蛋白的表达,并且细胞的迁移能力明显增强。但在表达KRas~(G12V)基础上敲低E47蛋白后,细胞的迁移能力明显减弱,说明E47蛋白在原癌基因Ras的热点突变KRas~(G12V)介导的肿瘤细胞的迁移过程中起着关键作用。结论探讨了Ras信号通路促进肿瘤细胞迁移的一种新机制,为治疗KRas~(G12V)介导的非小细胞肺癌提供了新的药物靶点。
2018年03期 v.44;No.171 16-22页 [查看摘要][在线阅读][下载 2283K] [下载次数：47 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：16 ] - 曹祺;靳宝军;程洁;王晶晶;陈书强;王晓红;
目的鉴定男性精浆中脂质成分,为其在生殖领域中的研究和应用提供参考。方法采用高效液相色谱—串联质谱(HPLC-MS/MS)多反应监测技术,对人精浆中脂质类化合物成分及含量进行分析。结果共鉴定出24个脂质大类,包含273种脂质种类。按化学结构可分为5类:甾醇类,包括游离胆固醇(Cho)、胆固醇酯(CE);甘油酯类,包括三酰甘油(TAG)、二酰甘油(DAG);磷脂酰胆碱类,包括卵磷脂(PC)、磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰甘油(PG)、磷脂酰肌醇(PI)、磷脂酰丝氨酸(PS)、磷脂酸(PA);溶血磷脂类,包括溶血磷脂二酸(LBPA)、溶血磷脂酰胆碱(LPC)、溶血磷脂酰乙醇胺(LPE)、溶血磷脂酸(LPA)、溶血磷脂酰肌醇(LPI)、溶血磷脂酰丝氨酸(LPS);鞘脂类,包括鞘磷脂(SM)、神经酰胺(Cer)、葡糖神经酰胺(Glu Cer)、乳糖神经酰胺(Lac Cer)、神经节苷脂(GM3)、红细胞糖鞘脂(Gb3)、1-磷酸鞘氨(S1P)、鞘氨醇(Sph)。在这24个脂质大类中,相对含量最高的前3类分别是Cho、SM和PC,包含种类最多的前3类分别是PC、PE和TAG。结论应用脂质组学分析方法显示男性精浆脂质,为今后分析不同病理状态下精浆内各种脂质代谢物的变化、了解脂质代谢的特征提供数据基础,为将来通过HPLC-MS/MS脂质组学技术发掘可预测精子质量的敏感、特异的脂质标志物提供新技术手段。
2018年03期 v.44;No.171 23-30页 [查看摘要][在线阅读][下载 1653K] [下载次数：141 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：14 ] - 王蕾;欧宗兴;
目的分析血清外泌体miR-184在非小细胞肺癌中的表达水平,及其对非小细胞肺癌的诊断效能。方法选取非小细胞肺癌患者112例、肺炎患者60例、体检健康者40例作为研究对象,分别收集3组血浆标本,提取经纯化鉴定的血清外泌体中miRNA,采用QRT-PCR法检测3组血清外泌体miR-184的表达水平,利用ROC曲线评价血清外泌体miR-184在非小细胞肺癌中的诊断效能。结果本研究纯化的样品中含有大量外泌体颗粒且具备既往报道的外泌体特性;3组血清外泌体miR-184的表达量,组间两两比较差异均具有统计学意义(P<0.05),且非小细胞肺癌患者血清外泌体miR-184表达量明显高于肺炎患者和体检健康者(P<0.05);ROC曲线图下血清外泌体miR-184对非小细胞肺癌的诊断敏感性为92.54%,特异性为84.19%,其曲线下面积为0.913[95%CI(0.726,1.031)]。结论血清外泌体miR-184在非小细胞肺癌中呈高表达,其临床诊断效能较高,可能成为非小细胞肺癌早期诊断的生物学标志物。
2018年03期 v.44;No.171 31-36页 [查看摘要][在线阅读][下载 1676K] [下载次数：306 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：4 ] |[阅读次数：14 ] - 马玉宝;常晓宇;李海燕;程宁;丁蛟;李娟生;郑山;申希平;蒲宏全;白亚娜;
目的探讨金昌队列人群腰围(WC)和非酒精性脂肪肝(NAFLD)的关联性,为NAFLD的防治提供科学依据。方法以金昌队列基线人群为研究对象,分析不同WC分组下NAFLD的患病率和患病风险,采用剂量反应关系分析WC和NAFLD间的关系。结果在21 002名研究对象中发现有4 481例NAFLD患者,NAFLD的患病率为21.34%。在金昌队列总人群、男性人群和女性人群中NAFLD的患病率随WC的升高呈明显的递增趋势(P趋势<0.05)。在金昌队列总人群和女性人群中,调整了年龄、文化程度、体育锻炼、吸烟、饮酒、血压、总胆固醇、甘油三酯和尿酸等混杂因素后,与WC<70 cm组相比,不同WC组会明显增加NAFLD的患病风险。WC和NAFLD剂量反应关系显示,在总人群、男性人群和女性人群中随着WC的增加,NAFLD的患病风险逐渐增加。结论 WC与NAFLD有明显的关联,随着WC的增加,NAFLD的患病风险逐渐增加。
2018年03期 v.44;No.171 37-40页 [查看摘要][在线阅读][下载 1400K] [下载次数：99 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：19 ] - 杨艳旭;程宁;李海燕;裴泓波;李娜;胡晓斌;丁蛟;李娟生;任晓卫;荣右明;李亚丽;李荣成;曹博宇;张德生;白亚娜;
目的了解金昌队列人群单纯性肾囊肿发病状况,为确定该发病高危人群预防疾病提供依据。方法选取金昌队列随访人群,以基线未患有单纯性肾囊肿31 518例为研究对象,采用χ2或χ2趋势性的假设检验分析随访2年后单纯性肾囊肿发病状况。结果金昌队列人群单纯性肾囊肿发病率为2.87%,标化发病率为2.55%。其中,男性人群标化发病率为2.91%,女性人群标化发病率为1.78%;内勤服务人员、小学及以下文化程度、丧偶、吸烟人群的单纯性肾囊肿发病率较高,分别为5.43%、5.77%、7.08%、3.54%。血压、血糖、尿酸的升高均与单纯性肾囊肿发病相关。结论中老年男性低文化程度吸烟人群是金昌队列单纯性肾囊肿发病的高危人群,应对其加强健康教育,倡导良好的生活习惯;同时对高血压、糖尿病、高尿酸血症等应早发现、早诊断、早治疗,从而提高队列人群的生命质量。
2018年03期 v.44;No.171 41-46页 [查看摘要][在线阅读][下载 1286K] [下载次数：75 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：20 ] - 周雪;王玉;
目的在课题组前期研究的基础上,继续追踪中国特有少数民族裕固族3—6岁儿童的营养问题是否得到改善,以便为该群体适宜的营养干预提供依据。方法采用随机整群抽样的方法,随机抽取甘肃省肃南裕固族自治县112名3—6岁裕固族儿童为调查对象,进行24 h回顾法结合半定量食物频率法的膳食调查及体格检查,并与3年前的研究结果进行对比分析。结果调查对象膳食结构明显改善,先前研究中发现的蔬菜、水果、肉蛋等食物摄入不足的问题均显著改善,其中肉/蛋类的摄入量较3年前增加了近2倍,奶类、蔬菜、水果的摄入量也明显增加。多种营养素的摄入量较3年前有较大幅度提高,除维生素A、钙、尼克酸的摄入量增加不明显外,其余大部分营养素的摄入量已达到推荐摄入量,体格发育状况较3年前有一定的改善。结论裕固族3—6岁儿童营养状况较3年前已显著改善,针对维生素A、钙缺乏等普遍儿童存在的营养问题,建议在增加富含上述营养素食物摄入量的同时,适量补充对应的营养制剂来加以改善,以促进其生长发育,预防营养相关慢性病的发生。
2018年03期 v.44;No.171 47-50页 [查看摘要][在线阅读][下载 1181K] [下载次数：53 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：23 ] - 安丽华;时克伟;李静;冯海霞;赵小春;王唯伟;孙新海;
目的研究乳腺癌动态增强磁共振成像(DCE-MRI)表现与人表皮生长因子受体-2(Her-2)、Ki-67表达的相关性。方法对80例乳腺癌患者术前行DCE-MRI检查,分析其影像学表现,包括肿块大小、形态、边缘、时间信号强度曲线、强化形式、早期增强率等。术后标本行免疫组织化学染色测定肿瘤细胞Her-2、Ki-67表达情况。分析DCE-MRI表现与Her-2、Ki-67表达的相关性。结果乳腺癌肿块强化形式及早期增强率与Her-2存在相关性(P<0.05);肿块形态、强化形式及时间—信号强度曲线类型与Ki-67存在相关性(P<0.05)。结论乳腺癌DCE-MRI表现与Her-2、Ki-67表达存在一定的相关性,可以间接评估肿瘤预后并为临床治疗方案提供参考。
2018年03期 v.44;No.171 51-55页 [查看摘要][在线阅读][下载 1805K] [下载次数：90 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：25 ] - 李莹屏;薛嵘;黄军悦;卢守燕;赵慧;马志刚;
目的观察三七总皂苷(PNS)是否可通过抑制低氧诱导因子(HIF-1α)减轻单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化(RIF)。方法 SD大鼠随机分为假手术组、UUO组、PNS组,每组10只;造模成功后PNS组给予PNS100 mg/(kg·d)腹腔注射,14 d后处死3组大鼠,留取大鼠血标本检测血尿素氮、血肌酐、胱抑素C;用ELISA法检测血清HIF-1α水平;UUO组织行HE染色、Masson染色,通过肾小管间质损害程度评分、RIF半定量分析积分值观察肾间质损害程度。结结果与假手术组比较,UUO组血尿素氮、血肌酐、胱抑素C、HIF-1α均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与UUO组比较,PNS组治疗后血尿素氮、血肌酐、胱抑素C、HIF-1α均下降,差异有统计学意义(P<0.05);肾脏组织HE、Masson染色均显示:与假手术组比较,UUO组肾小管间质损害程度明显增加(P<0.05);与UUO组比较,PNS组肾小管间质损害程度明显减轻(P<0.05)。结论三七总皂苷可改善UUO大鼠RIF程度,并降低HIF-1α水平,可能是通过抑制HIF-1α减轻RIF。
2018年03期 v.44;No.171 56-60页 [查看摘要][在线阅读][下载 2087K] [下载次数：102 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：20 ] - 杜文;王建凯;马晓春;郭逸潇;蔡宏懿;李亚洲;
目的通过对共面与非共面调强放疗计划的比较,探讨二者在鼻腔非霍奇金淋巴瘤调强放疗中的剂量学差异。方法选取10例鼻腔非霍奇金淋巴瘤患者,分别设计1组共面7F调强计划(7野均分),2组非共面7野调强计划7F-N1(4个共面射野和3个矢状面射野)和7F-N2(5个共面射野和2个矢状面射野)。比较3组计划的靶区剂量学指标D_(2%)、D_(98%)、D_(mean)、D_(50%)、V_(100%)、V_(107%)、均匀性指数(HI)、适形度指数(CI),机器跳数(MU)和危及器官的剂量学指标。结果 7F-N1与7F相比,D_(98%)的均值减小了0.06(P<0.05);7F-N2与7F相比,V_(100%)的均值减小了0.30(P<0.05)。7F-N2与7F-N1相比,靶区各剂量学指标及机器跳数无统计学差异。7F-N1与7F相比,患侧晶体、健侧晶体、健侧眼球和健侧视神经的Dmax的均值分别减少2.15、2.63、6.88、3.53 Gy(P<0.05),脑干D_(max)的均值增加6.75 Gy(P<0.05),患侧腮腺、健侧腮腺的D_(mean)的均值分别降低了3.77、4.65 Gy(P<0.05)。7F-N2与7F相比,健侧晶体、患侧眼球、健侧眼球、患侧视神经、健侧视神经和视交叉的D_(max)的均值分别下降了1.27、1.95、5.10、3.36、4.35,4.78 Gy(P<0.05),患侧腮腺、健侧腮腺的D_(mean)的均值分别下降了3.20、2.48 Gy(P<0.05)。7F-N2与7F-N1相比,患侧晶体和健侧晶体的D_(max)的均值分别增大了1.41、1.36 Gy(P<0.05),患侧视神经和视交叉的D_(max)的均值分别减少了2.76、4.66 Gy(P<0.05),健侧腮腺的D_(mean)的均值增加了2.17 Gy(P<0.05)。结论在鼻腔非霍奇金淋巴瘤的放疗中,7F-N1较7F及7F-N2在保护晶体及腮腺方面更具优势。
2018年03期 v.44;No.171 61-66页 [查看摘要][在线阅读][下载 2422K] [下载次数：25 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：10 ] - 常瑞明;张磊;陈锦武;陈庆瑜;王鹏;杨涛;常建星;
目的检测促炎因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和抗炎因子白介素-10(IL-10)在骨髓间充质干细胞(MSC)联合RANK-Fc促进GK糖尿病大鼠骨折愈合过程骨组织中的表达,探讨促炎—抗炎平衡在此过程中的作用。方法 7—8周龄SPF级雄性GK大鼠40只,喂养高脂饲料糖尿病造模。造模成功后(随机血糖≥11.1 mmol/L)选取大鼠左侧肢体,人为造成股骨中段开放性骨折并给与克氏针复位内固定,随机分为4组(n=10只),其中3组分别在骨折周围肌肉软组织注射培养浓缩的骨髓MSC、RANK-Fc、骨髓MSC和RANK-Fc混合液,于实验后第12周分别行X线摄片、取骨折处骨组织检测TNF-α和IL-10的表达。结果骨折内固定术后第12周摄片对照组骨愈合不佳,断端骨皮质不连续,骨密度较低;MSC组、RANK-Fc组、MSC+RANK-Fc组可见骨密度较对照组高,骨痂生长,连续爬行,骨皮质连续,MSC+RANK-Fc组愈合情况最佳;Western blot结果:对照组促炎因子TNF-α明显高于MSC组、RANK-Fc组、MSC+RANK-Fc组,而抗炎因子IL-10明显低于其他3组(P<0.05)。结论骨髓MSC联合RANK-Fc局部注射可以抑制GK糖尿病大鼠骨折内固定术后机体的炎症反应,从而促进骨折的愈合。
2018年03期 v.44;No.171 67-71页 [查看摘要][在线阅读][下载 2522K] [下载次数：77 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：17 ] - 鲁虹霞;李燕;梁涛;付雪丹;
目的探讨经阴道超声弹性成像(TVES)在宫颈癌诊断及分期中的临床应用价值。方法选取病理证实的56例宫颈癌、30例宫颈上皮内瘤变(CIN)患者及30例健康对照者,行经阴道超声(TVUS)常规检查及TVES检查,获取宫颈弹性图像进行评分,并测量弹性应变率比值(SR)。结果弹性评分≥4分为截断值以诊断宫颈癌,弹性评分诊断宫颈癌的敏感度、特异度、准确度分别为85.71%,83.33%,84.88%;SR诊断宫颈癌的最佳临界值为3.73,敏感度为85.71%,特异度为90%;弹性评分和SR判断宫颈癌的ROC曲线下面积分别为0.899、0.912,两种检查方法对宫颈癌的诊断准确性比较无明显统计学差异(P>0.05)。结论 TVES在宫颈癌诊断及分期中具有较好的临床应用价值,是临床筛查宫颈癌的有效影像学手段。
2018年03期 v.44;No.171 72-76页 [查看摘要][在线阅读][下载 2456K] [下载次数：55 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：4 ] |[阅读次数：16 ]